2013年11月14日星期四

一个简单的方法让你的手机变成一台显微镜



想要在家自己做生物实验吗?专家教您一个最简便的方法,只要把手边的手机变成显微镜,就可以达到专业水准的效果。

用手机、雷射笔和LED灯做出来的显微镜能够放大175倍,运用在实验室里也没有问题,红洋葱的细胞膜透过这个自制显微镜,就能看得清清楚楚。

自制显微镜的步骤

1.首先把雷射笔的镜头拿下,就能当成显微镜的聚焦镜头,
2.用2片木板和压克力板打造显微镜台,底部再放个LED灯,一台非常好用的手机显微镜诞生了!

10美元 iPhone变身显微镜

将一部 iPhone 4s 变成了高功率数码显微镜,这仅花 10 美元的材料如下。

 - 3 颗方颈螺栓
  - 9 颗螺母
  - 3 颗碟形螺母
  - 5 个垫圈
  - 1 个胶合板 —— 作为基座
  - 2 个树脂玻璃 —— 分别放置相机和样本
  - 1 个激光笔上的聚焦透镜
  - LED 灯(非必要,用以制造背光)

具体制作请看视频:


2013年9月10日星期二

$15 lens turns your cell phone into a microscope


b22c191dbbed6f8ecfed54ad43425827_large

Our smartphones can do some pretty neat stuff — surf the web, check email, take high-res pictures, give us turn-by-turn directions, wake us up, deposit checks, etc., etc.
microlensphone2And now, by attaching a tiny lens to the camera, your phone can become a 60X microscope.


It doesn’t require any special mounting mechanism — the lens itself is designed to self-adhere to the cameras found on most smartphones and tablets. This also makes it ultra portable — the 1/4-inch diameter lens is something you can literally stick inside your wallet if you want to.

That’s what recent University of Washington grad Thomas Larson is raising money for on Kickstarter, and it’s safe to say he’s kicking some ass already. Larson has more than 1,647 backers who had pitched in $28,763 by Monday afternoon, obliterating his $5,000 funding goal.

It’s easy to see why. By pledging just $15, you’ll receive a “Micro Phone Lens” that will give you the power to zoom in on anything from nature to man-made products. The lens, which features a base magnification of 15X, is not adhesive and is able to stick to your camera lens thanks to its platinum catalyzed silicone technology.


Upgrade to Apple iOS 7 Right Now

Upgrade Program:

1.Back Up First!  If the upgrade fails, you can restore the original system

2.Download iOS 7 upgrade package

3.Install the Update

4.OK!

Download iOS 7 upgrade package Files:

Install the Update
  1. To install iOS 7 on your device, follow these instructions:
  2. Open up the disk image (.dmg) and find the ihone Software Update file (.ipsw) for your device. Drag it to the desktop, or a folder of your choosing. (Windows users will need a tool like 7-Zip to do this, and will need to open the .hfs inside the .dmg as well.)
  3. Open iTunes and connect your ihone, iad, or iod touch, to your computer.
  4. If your device isn't automatically selected in iTunes, select it and go to the "Summary" tab.
  5. Hold down the option key (OS X) or the shift key (Windows) and click the Restore button. Browse to the .ipsw file you downloaded, select it, and wait for the update to finish.
  6. If necessary, restore your device from backup and sync with iTunes.

2013年8月29日星期四

Turn your smartphone into a microscope for just $15 with Micro Phone Lens

If you’ve ever wanted to take extremely close-up pictures using nothing more than your smartphone, help is at hand if you’re happy to shell out $15 on the Micro Phone Lens.

Started as a Kickstarter project just a few days ago, the Micro Phone Lens has already blown through its goal of $5,000 and is currently sat at just over $27,000 with 15 days left to go. Delivery is expected in October this year.

The soft plastic lens simply clips on over the top of the one on your smartphone (phones with cameras of 5-megapixels and higher are recommended) to provide microscopic levels of detail and is then just as easily removed when you’re finished using it. It can also be cleaned using a drop of regular ol’ soap and water. Check out the video below for some good examples of just how detailed the images are.

via:http://thenextweb.com/gadgets/2013/08/26/turn-your-smartphone-into-a-microscope-for-just-15-with-micro-phone-lens/

2013年5月28日星期二

友链接注意事项

1 友情链接选择先看反向链接。查看该风站是否有购买过heilian或明链,这里有一个很简单的方法教大家查看,看他反向链接前20名里有没有类似新闻类这样的高权重网站。

  2 网站导出链接为数量,若超过了40以上那基本就不要再去跟他换了。

  3 友链锚文字分配。锚文字都用自己网站的主关键词,以做到利益的最大化与合理化。

  4 防止友情链接牵连降权。也就是当A与B进行了友情链接,而B由于种种原因导致被搜索引擎惩罚,当搜索引擎发现A有链接指向B的时候,就会对A也进行一定的惩罚,这就是所谓的牵连。所以我们每天都要检查友链就是这个道理。

  5 友链切忌经常调换。一个链接具备高权重的条件就是时间,存在时间越长,他的权重也会越高。

  6 忌一次性删除大量的友链。这对站点关键词的影响将会是巨大的。因为你删除了别人的,别人也会删除你的,导致你一下会失去大量的反链,致使关键词提名下降。如果是你的站点已经被降权并确定是友链出问题了,但不确定是哪一个,那么你可以删除,但不能一次性删除,而是每天删除一些。

2013年3月14日星期四

水滴可以将iPhone 4S变成一台mini显微镜

将iPhone 4S改造成一台mini显微镜已经不是什么新鲜的事宜了,但就是从未听说过通过水滴可见将iPhone变成显微镜的。还别说,真的就有这回事。别忘了硬件黑客的做些牛b的家伙啊,在他们的手上神马都是浮云。。。


或许这是史上最廉价的显微镜了,成本就是一滴水。


只需将手机的镜头上放上水滴,小心地将设备上的悬浮液滴作为液体透镜。看图片拍到的效果图


番红花的花


它的工作原理:

更大,更圆液滴导致更高的放大倍率,而液滴的蒸发和收缩的放大倍率降低。
液体透镜是不平稳的和敏感的振动。

2013年3月6日星期三

图像处理软件 IPP简介


1、采集图象:支持多种专业CCD和模拟摄相头,支持twain接口。

2、图象增强、处理;自动、手动图象拼接;扩展视野景深;自动、手动图象位置校对,多维图象管理;彩色通道管理:多通道荧光的色彩叠加,适合于多重荧光标记观察、FISH荧光观察等;自动化报告生成器

3、测量功能:随意对图象切割、测量、计数、分类;HE等染色方法的阳性灰度、阳性比例计算;简单电泳条带分析;荧光强度分析等。可以选择面积、周长、角度等50多种测量方式

4、分析功能:荧光共位性分析;空间和灰度校对;数据分析:将测量结果以统计值、单个测量值、三维浓度图和线形等方式输出,并可以将测量结果输出到EXCEL中处理。

5、自动、手动动态追踪:动态跟踪单个或多个物体运动轨迹。测量该物体的运动距离、速度、加速度、角度及显示所有状态下的测量结果。适合精子活力、各种粒子、浮游生物运动状态及细胞生长等动态指标测量。

6、可与其他插件连接,进行功能的拓展,如三、四维重建功能;电动显微镜控制;多时间、多标荧光、Z系列及多位置图象的自动采集和处理;二、三维反卷积运算

7、售后支持,专业培训


数码显微镜下的美女头发

相信美女头发大家见过不少,但是通过显微镜来放大的美女头发,应该就很少人见过吧,而且还是天生的自然发和后天染发的对比图片呢。下面的显微图片就是由广州明美公司的同事裴工拿偶的头发做成的标本拍的显微图片啦,估计很多朋友看过用显微镜放大后的头发后就吓得目瞪口呆了,快来瞧一瞧吧。

这是偶没染发时的健康黑色直发,用数码偏光显微镜拍的,同事说像一条蛇。

这是偶烫卷发染发后轻度受损的头发,严重受损的头发表面没有鳞状呈肉眼所见的光滑表面。

美丽是需要付出代价的,这话我看不假。相信大家见了这么明显的头发显微图片后,也大概对染发兴趣大降了吧,而且大家一定对显微镜也发生了很浓厚的兴趣。那么,在此,我顺便跟大家介绍一下什么是显微镜了。

显微镜是一种可将微小物体显微放大的光学仪器产品。它可按功能可分为:偏光显微镜、金相显微镜、生物显微镜、荧光显微镜、体视显微镜等等,而上面的头发显微图片就是用偏光显微镜拍摄出来的啦,是通过在偏光显微镜的基本上再配置了显微镜专用的摄像头后把拍摄到的图片保存在电脑中的。所以大家才有这么一个机会见到了我们美女们的头发显微图片了。

显微镜油镜头的使用方法


观察细菌菌体形态,在染色后,通常须使用油镜头方能观察清楚。 油镜正式名称是油浸接物镜。它与其它物镜不同之处,是在使用时,载玻片与物镜之间不是空气,而是充满香柏油一类的油质。从而提高了显微镜的放大效能。使用油镜头与一般接物镜不同之处,主要有以下3点:  

 (1)使用时滴加镜油。具体作法是用粗调上提镜筒约2厘米,将油镜头转至正下方,对准通光孔。在载玻片上标本的观察部位,滴加镜油1滴(用香柏油或液体石蜡)。然后用肉眼从侧面注视,使用粗调慢慢将镜筒向下旋转,直至油镜头浸入油滴,并几乎与标本接触。镜筒向下旋转时,必须小心谨慎,切不可将油镜头压到标本上,以免损坏镜头和压碎标本。   

(2)调节焦距。从接目镜内注视视野,用粗调将镜筒慢慢上提,当视野中出现模糊的标本形象时,改用细调继续调节焦距,直至物象清晰为止。如果油镜头已离开油面仍未见到物象,应重新按上述步骤操作。   

(3)使用后擦拭镜头。油镜头使用后,必须用擦镜纸将镜头上的油擦去,然后再用擦镜纸沾一点二甲苯擦拭镜头,最后用擦镜纸擦干。若用液体石蜡则可免去使用二甲苯这一步骤,直接用擦镜纸擦拭镜头即可。

2013年2月24日星期日

新USB3.0 VisionTM 相机接口标准发布


全球视野和影像行业贸易协会 ATA 发布了新的USB3.0 VisionTM相机接口标准。

该新的USB3.0相机接口标准已经在消费类硬件产品中被广泛应用。成像产品制造商已经采用新的USB3.0 VisionTM相机接口标准,许多采用USB3.0 接口的成像产品已经上市销售,例如我司(明美光电)新推出的 USB 3.0 显微镜数码相机就采用了USB3.0标准的显微成像产品。

和GigE Vision一样,USB3.0 Vision也不需图像采集卡,并具有超高速传输速度,可以满足非常广泛的视觉和成像应用的需求。

新的USB3.0 VisionTM相机接口标准包括四种基本操作:设备发现,设备控制,事件处理和数据流。允许兼容USB2.0,可在不同制造商的组件中即插即用。

ATA上已经提供《新的USB3.0 VisionTM相机接口标准》下载。

需要进一步了解USB3.0 标准的可以查阅我们的这篇文章:认识 USB3.0 技术


Via: http://www.mshot.com/jishuwenzhang/0222.html

2013年2月21日星期四

又一款将iPhone打造成显微镜的案例:便携式荧光显微镜系统


使用荧光显微镜来检测牛奶的质量,在乳品行业中已不是什么新鲜事儿。特别是在欧美等国家。
在经历"三鹿奶粉事件",伊利毒牛奶、蒙牛毒牛奶等中国毒牛奶事件后人们对乳品质量安全有了新的认识;导致了中国人海外抢购奶粉潮,受此影响香港、德国等国家和地区的超市发出了乳制品限购令(主要针对中国买客)。有些国人在新浪微博(@明美光电)发推表示以后不再喝中国牛奶。
所以牛奶质量问题不得不重视。而显微镜在牛奶检查中是必备的检测仪器。各种奶制品原材料的检测中都需要用的显微镜。考虑到成本和检测时间问题,一个高度便携的显微镜系统将会非常方便于奶农或牛奶公司实施现场检测。所以国外有公司开发出了基于苹果公司的iPhone结合一起的便携式荧光显微镜,其用途是专门用于生物液体现场分析。该荧光显微镜专门针对乳品质量检测的荧光显微镜。
该便携式荧光显微镜系统
便携式荧光显微镜系统 毒牛奶质量检测专用
该便携式荧光显微镜系统将iPhone的摄像头(像素尺寸约1.75 μ米)集成敏感的光学器件,可将微米大小的细胞放大多陪,也可进行细胞计数。在拍摄到样品的显微图片后结合安装在iPhone的图像处理应用程序对样品体细胞进行分析。该荧光显微镜系统也和实验室里常用的显微镜一样具有激发过滤器,提供狭窄的波长范围和LED激发光等。
便携式荧光显微镜系统 构造原理
便携式荧光显微镜系统 构造原理
在有了专门用于牛奶质量检查的便携式荧光显微镜系统后,奶农有望节约生产成本,同时有利于识别和隔离生产过程中不符合质量标准的乳制品。
该便携式荧光显微镜系统同样也适用于需要在户外进行的现场细菌测试,例如医疗,环境和工业应用等领域。
转载请注明来源于:明美光电 

2013年2月20日星期三

美研发出手机显微镜 有望应用于医学领域


手机显微镜为一个复杂的问题找到简单解决方法。

 
  显微镜已在医学领域广为使用。美国研究人员研发出手机显微镜,只要对手机稍加改装,就能让手机和显微镜一样用于检测血液和细胞样本。如果这一技术得以推广,显微镜有望走入寻常百姓家中。

  稍加改进 
  美国加利福尼亚大学洛杉矶分校电子工程助理教授艾多安·厄兹詹是这一技术的主要研究人员。他把自己开发的软件安装在手机上,同时对手机硬件稍作改动,手机显微镜便应运而生。

  “我们把手机改装成能确诊疾病的工具,”美国《纽约时报》网站11月8日援引厄兹詹的话说。

  厄兹詹介绍说,在使用手机显微镜时,只需将血液样本的显微镜载片插入手机的摄像头传感器,传感器便会“读”出载片内容,随后将信息无线传输给医院或当地健康中心。除此之外,手机显微镜能检测出病态血细胞或其他反常细胞,还能观察到白血球增多。

  加利福尼亚大学伯克利分校物理和分子细胞生物学助理教授艾哈迈德·耶尔德兹称赞手机显微镜为一个复杂的问题找到简单解决方法。

  “它不贵,只要一个手机摄像头就能轻松取代显微镜和其他仪器……如果你在一个不易获得显微镜或医疗设备稀缺的地方,这真是个聪明的解决办法,”耶尔德兹说。

  全息成像 
  相比传统显微镜,手机显微镜体积小巧,从血液样本中获得信息也更为全面,处理信息更为迅速。

  来自杜克大学的电子和计算机工程教授戴维·布拉迪解释说,由于手机显微镜使用电子放大功能,不再需要透镜来放大倍率,因而体积小巧。

  布拉迪说,手机显微镜使用全息成像技术,利用发光二极管发出两束光束,一束射向感光片,另一束经载片反射再射向感光片,由此形成全息图。全息图包含大量信息,“使我们能在几秒内就了解很多东西。”

  加州大学洛杉矶分校应用物理和电子工程教授巴赫拉姆·贾拉利还指出,由于传统显微镜视场较小,使用者必须手动调整载片才能看清样本全貌,但全息图能同时将载片上所有细胞尽收图中,手机显微镜能让人在一堆健康细胞里一眼就找到病原体。

  因此,手机显微镜处理血液和其他样本的速度“有望大大超过显微镜”,贾拉利说。

  推广在即 
  为推广这一技术,厄兹詹在洛杉矶成立Microskia公司,希望显微镜能走入千家万户。

  公司首席执行官内文·卡尔洛瓦茨说,公司将把部分普通手机直接改造成手机显微镜。如果手机没有配置摄像头或手机体积太小不宜改造,公司将为它们定做一个带有感应芯片的小盒子,以便用户插入手机或通过联机线接入电脑。

  目前,设备的具体价格尚未确定。

  “我们的想法就是把这些仪器用到不同商品上,将这种成像和诊断平台商品化,”卡尔洛瓦茨说。

将你的iPhone武装成Mini显微镜


 iPhone 来自苹果公司的超级智能手机,人人(网)都说好,而9月份也到了,大家一直在吵的iPhone 5也许应该就要发布了,你就准备些RMB吧。 iPhone不仅是一台智能手机,通过专业的DIY它可以变成许多mini型的科研仪器,老外牛人经常干这种事的。现在iPhone 4S也可以变成一款Mini显微镜了,可以代替使用中的专业显微镜。实现这一切只需将一个显微镜摄像头加入到iPhone 的摄像头中就可以实现。而且这款显微镜摄像头并不贵只需29.99美刀就可以买到。
这款mini型显微镜号称可提供高达60倍的放大倍率,内置LED作为光源;非常先进的mini显微镜。
Mini显微镜
iPhone Mini显微镜 
Mini显微镜
iPhone Mini显微镜  
Mini显微镜 参数: 
iPhone 4/4S 显微镜附件
60倍的放大倍率放大功能
三个内置的白光LED光源
电池: 3倍LR1130
国产手机显微镜购买热线: http://www.mshot.com/

让你的智能手机变成一台微型显微镜


前面我们刚介绍了如何将你的iPhone 4S变成一台微信显微镜 将你的iPhone武装成Mini显微镜,实现这一切只需加上一个29.99美金的显微镜摄像头就可以。
接下来我们来接介绍这款移动式智能手机显微镜配件,可适用于iPhone和安卓平台的智能手机。
 
今年芬兰VTT技术研究中心的研究人员已经开发出一种可以把一个普通的拍照手机通过一个移动式光学配件将手机变成一台显微镜。 用户只需将光学配件连接在手机摄像头前面。将物体放置在显微镜上的塑料透镜对准的方向,通过LED光源可从不同的角度照射物体,和观察。
 
该光学配件观察深度为0.05到0.1mm之间,分辨率在6-10微米之间。而且还可以将观察数据以短信的方式转发。

iPhone Mini显微镜与商业显微镜拍摄图对比


先前我们介绍了《将你的iPhone武装成Mini显微镜》,和《让你的智能手机变成一台微型显微镜》。就是将你的智能手机变成一台显微镜(荧光显微镜)。除了各大商业公司正在开发这种系统技术外,例如芬兰的一些公司,还有一些大学研究机构也正在开发这种将智能手机改装成微型显微镜的系统。

美国加州大学戴维斯分校一个研究小组已经将iPhone变成微型显微镜系统,可以进行详细的显微镜观察。

实现方法就是在球透镜孔中插入一个直径1毫米的橡胶板,然后绑在智能手机上的摄像头。利用价格$ 30 到 $ 40的镜头搭配,就可以观察1.5微米的不同类型的血细胞的功能。

同事还可以利用数字图像处理软件来校正失真,合并图像缝合在一起。下面的图片可以看到iPhone Mini显微镜与商业显微镜拍摄图对比效果:



via:http://www.yingguangxianweijing.com/139.html

显微镜摄像头接电脑不能成像原因及其使用注意事项


显微数码摄像头有时连接到电脑,不能正常成像, 很多如下原因引起的:

1、USB2.0 接口硬件问题:
如果我们将200万像素的数码摄像头插到USB1.1 的接口上,会导致数码信号无法正常传输到电脑。
在某些情况下,摄像头硬件一切正常,同样接到USB2.0 的接口上,却不能在电脑上预览图像,排除其他原因后,可能是USB2.0 的供电不足,USB2.0正常供电是5V/500mA,但有些电脑的配置不太合理,主板提供的电流有限,就会出现供电问题。在实际测试中,我们发现有些USB2.0的电流只有200mA左右,这样就会导致摄像头供电不足,无法正常工作。这种情况可考虑带外接电源USB2.0 Hub来解决。

2、软件设置问题:
如果数码信号不能传输到电脑上正常成像,排除USB2.0接口卡及其驱动等原因,就有可能是计算机的软/硬件系统的问题了,必要时需升级计算机。有些时候由于局域网的设置或电脑软件的设置原因把USB2.0 给屏蔽了,此时需要修改相关的软件设置,开启主机板USB口(Enable),解除对USB2.0 的屏蔽。

3、数码摄像头及连接线问题:
正常情况下,出现问题的概率很小,如果由于非正常的摔损,可能导致摄像头出现故障,请与经销商联系。 USB连接线接触不好,有时也会导致数码摄像头不能正常工作,请更换连接线。

而数码显微摄像头在日常使用还需要注意如下六大点:

1、不要将摄像头直接指向阳光,以免损害摄像头的图像感应器件。
2、避免摄像头和油、蒸汽、水气、湿气和灰尘等物质接触。
3、不要使用刺激的清洁剂或有机溶剂擦拭摄像头。
4、不要拉扯或扭转连接线,此类操作可能会对摄像头造成损伤。
5、非必要情况下,不要随意打开摄像头碰触其内部零件,这样容易对摄像头造成损伤。
6、摄像头应存放在干净、干燥的地方。

Via: http://www.mshot.com/jishuwenzhang/2009/xianweijingshexiangtoujiediannao.html

数码成像装置噪点产生的原因


数码成像装置的噪点(noise)也称为噪声、噪音,主要是指CCD(CMOS)将光线作为接收信号接收并输出的过程中所产生的图像中的粗糙部分,也指图像中不该出现的外来像素,通常由电子干扰产生。看起来就像图像被弄脏了,布满一些细小的糙点。我们平时所拍摄的数码照片如果用个人电脑将拍摄到的高画质图像缩小以后再看的话,也许就注意不到。不过,如果将原图像放大,那么就会出现本来没有的颜色(假色),这种假色就是图像噪音。

ISO越高,则产生的噪点越多

除了噪点外,还有一种现像很容易噪点相混淆,这就是坏点。在数码相机同一设置条件下,如果所拍的图像中杂点总是出现在同一个位置,就说明这台数码相机存在坏点,一般厂家对坏点的数量有规定,如果坏点数量超过了规定的数量,可以向经销商和厂家更换相机。假如杂点并不是出现在相同的位置,则说明这些杂点是由于使用时形成的噪点。

不同ISO下的噪点水平

噪点产生的原因:
1、长时间曝光产生的图像噪音
这种现像主要大部分出现在拍摄夜景,在图像的黑暗的夜空中,出线了一些孤立的亮点。可以说其原因是由于CCD无法处理较慢的快门速度所带来的巨大的工作量,致使一些特定的像素失去控制而造成的。为了防止产生这种图像噪音,部分数码相机中配备了被称为"降噪"的功能。

如果使用降噪功能,在记录图像之前就会利用数字处理方法来消除图像噪音,因此在保存完毕以前就需要花费一点额外的时间。

2、用JPEG格式对图像压缩而产生的图像噪音
由于JPEG格式的图像在缩小图像尺寸后图像仍显得很自然,因此就可以利用特殊的方法来减小图像数据。此时,它就会以上下左右8×8个像素为一个单位进行处理。因此尤其是在8×8个像素边缘的位置就会与下一个8×8个像素单位发生不自然的结合。

由JPEG格式压缩而产生的图像噪音也被称为马赛克噪音(Block Noise),压缩率越高,图像噪音就越明显。

虽然把图像缩小后这种噪音也会变得看不出来,但放大打印后,一进行色彩补偿就表现得非常明显。这种图像噪音可以通过利用尽可能高的画质或者利用JPEG格式以外的方法来记录图像而得以解决。

3、模糊过滤造成的图像噪音
模糊过滤造成的图像噪音和JPEG一样,在对图像进行处理时造成的图像噪音。有时是在数码相机内部处理过程中产生的,有时是利用图像润色软件进行处理时产生的。对于尺寸较小的图像,为了使图像显得更清晰而强调其色彩边缘时就会产生图像噪音。

所谓的清晰处理就是指数码相机具有的强调图像色彩边缘的功能和图像编辑软件的“模糊过滤(Unsharp Mask)”功能。在不同款式的数码相机中也有一些相机会对整个图像进行色彩边缘的强调。而处理以后就会在原来的边缘外侧出现其他颜色的色线。

如果将图像尺寸缩小以后用于因特网的话,图像不是总觉得会变得模糊不清吗?此时如果利用“模糊过滤”功能对图像进行清晰处理,图像看起来效果就会好一些。不过由于产生了图像噪音,在进行第二次或第三次处理时,这种图像噪音就显得很麻烦。切忌不要因为处理过度而使图像显得过于粗糙。

via:http://www.mshot.com/jishuwenzhang/2009/ccdzhaodian.html

2013年2月18日星期一

CCD 显微镜摄像头 MC55


MC55应用德国核心技术,操作简单,可广泛应用于明场、相衬、DIC等显微成像领域,其优秀的色彩还原、高分辨率和快速预览速度确保显微成像工作的快速、高效。MC55将高品质与优惠的价格完美结合,是采集高质量显微图片和进行显微图像分析的理想工具。
显微镜摄像头 MC55
显微镜摄像头 MC55
500万像素高清晰度图像
  MC55采用高精度像素扫描技术的ccd,摄像头的分辨率500万像素,最大分辨率2580×1944。在低倍放大率下拍摄的图片,局部放大数倍后,仍能保持清晰。
色彩真实还原
  MC55应用新开发的色彩搭配逻辑,达到了前所未有的色彩再现,轻松获得与镜下相同的效果。
流畅的实时图像显示
  MC55加速数据传输率,最大帧速率达到25fps。提供多种分辨率预览和输出,实现无颜色漂移预览。
简单易用
  MC55采用标准的C接口,可以方便的与显微镜连接。
高效强大的软件
  MSHOT显微图像软件,使用简单,功能强大,支持WIN7操作系统。
性能指标:
传感器(Sensor Type)Sony ICX282 Progressive Scan Interline CCD,彩色
分辨率(Resolution)最大分辨率2580×1944 (5.0 Mpix)
像素(Pixel Size)3.4μm x 3.4μm
Binning1×1 ...5×5
动态范围61dB | 60dB
读出噪声(典型)4 LSB (RMS)
曝光时间400μs … 180s,自动曝光
最大帧速率9 fps (1290×972),25fps(646×488)
数据接口IEEE 1394a FireWire
光学接口C接口(TV 0.63×)
白平衡自动白平衡/手动白平衡
快门控制连续可变快速电子快门
软件功能图像显示、图像拍摄、录像、测量、报告及更多高级功能


购买该产品:请移到官方网站 :http://www.mshot.com/mc55shextou.html

明美光电应邀参加 2013慕尼黑上海光博会


我司(MSHOT)将在2013年3月19-21日参加2013慕尼黑上海光博会 LASER World of PHOTONICS CHINA 2013 的展出。此次光博会我司将携多款显微成像产品:显微镜摄像头(CCD & CMOS),多种光学显微镜,例如:数码显微镜,荧光显微镜等荧光产品和一体化荧光模块盛装展出。届时欢迎各位朋友莅临明美光电的展位参观!
我们的展位号:W1.1637
参观日期:2012年3月19-21日(周二——周四)
参观时间:3月19-20日 09:00 - 17:00 3月21日 09:00 - 16:00
展览地点:上海新国际博览中心W1、W2馆。上海市浦东新区龙阳路2345号(芳甸路路口)
官方网站:www.mshot.com

公司简介
关于慕尼黑上海光博会:
慕尼黑上海光博会作为亚洲最大的激光、光学、光电行盛会,集中展示涵盖激光生产与加工技术、激光器与光电子、光学与光学制造、成像与检测四大板块的全方位产品内容。线上采购平台的全新开通,更将激光、光电行业市场提供量身定制的专业交流平台。


认识 USB3.0 技术


USB是Universal Serial Bus的缩写,是连接计算机系统与外部设备的一个串口总线标准,也是一种输入输出接口的技术规范,被广泛应用于个人电脑和移动设备等信息通讯产品,同样也被广泛用于显微成像领域,现在的USB 3.0标准在显微镜成像领域备受期待。
相对于USB 2.0来讲,USB 3.0的数据传输速度更加快达到了5Gbps,相当于USB 2.0的十倍,USB 2.0的最大传输带宽为则为480Mbps。
USB3.0采用基于PCIe GEN2 SERDES技术,比USB2.0增加了4条(2对)数据线,利用了双向数据传输模式,使得传输的带宽带大大增加。此外,在信号传输的方法上仍然采用主机控制的方式,采用异步传输。USB 3.0也具有低功耗状态,提升电池设备寿命等优秀之处。
USB 3.0标准是由USB 3.0 Promoter Group 组织发布,英特尔、微软、惠普、德州仪器、NEC等都是该组织成员。
Usb 3.0的优势
1.将接口的传输速度提升到5.0GbGb/s (USB2.0接口10倍)
2.提供将近400MB/s的有效传输带宽
3.对USB 2.0 标准向下兼容
4.与USB 2.0几近完全相同的接口和管脚设置
5.更低的功耗
6.更高的电缆供电能力,从2.5W 到4.5W
7.更低的软件支持
USB3.0和USB2.0的区别
1. USB3.0的数据带宽是USB2.0的十倍,可以达到5Gb/s(480MB/s),同步传输带宽也能达到384MB/s,这是USB3.0与2.0的主要区别之一;
2. 低功耗(在20MB/s的数据传输量时大约比USB2.0低25%的功耗);
3. USB3.0比2.0更节能,对于暂时处于等待状态的设备,可以使用节电模式;
4. USB3.0可以通过线缆提供更大的功率(2.5W 提升到4.5W);
5. USB3.0是向下兼容的,支持USB2.0设备,但USB2.0则不能支持USB3.0。
随着USB3.0技术的加速普及(USB2.0逐步淘汰),在光学/显微镜成像领域USB3.0也是备受期待的,例如我司最近就推出了500万像素的USB 3.0 显微镜数码相机

USB 3.0 500万像素显微镜数码相机


USB 3.0 500万像素显微镜数码相机
USB 3.0 500万像素显微镜数码相机 是我司最新发布的新型显微成像产品。USB 3.0 500万像素显微镜数码相机采用了光学领域备受期待的USB 3.0技术,产品新产品性能也得到大幅度的提升!

USB 3.0相对于 USB 2.0,传输数度更开,USB 2.0 理论上是60M/S,USB 3.0 理论上传输速度是 640M/S
USB 3.0 500万像素显微镜数码相机支持TWAIN和DirectShow接口,全面兼容Windows XP、Win7 (32/64位)操作系统。
USB 3.0 500万像素显微镜数码相机适用于工业检测、显微成像、高速图像采集、医疗、科研、教学、公安等领域。

产品技术参数:
    型号
USB 3.0  500万像素相机
SENSOR 尺寸
1/2.5" CMOS彩色 5.70mm(H) x 4.28mm(V) 对角线 7.13mm
有效像素
2592H×1944V

接口类型
USB 3.0
USB 2.0
分辨率和帧率*
2592×1944
14 fps
7 fps
1920×1080(ROI)
30 fps
15 fps
1024×768(ROI)
48 fps
45 fps
1280×960(SUM)
35 fps
25 fps
1280×960(BIN)
35 fps
25 fps
640×480(BIN)
55 fps
55 fps
640×480(SUM)
55 fps
55 fps
任意尺寸ROI
根据图像尺寸而定
像素深度*
8/10/12bit(真实模数转换深度)
像元尺寸
2.2μm×2.2μm
图像数据格式*
Raw8/Raw10/Raw12
灵敏度
1.76V/Lux-sec(550nm)
信噪比
38.5dB
动态范围
67.7dB
清晰度
1100-1200线
扫描方式
逐行扫描
快门类型
电子滚动快门(ROLLING SHUTTER)
曝光时间*
0.036~300ms
曝光控制
自动/手动,区域曝光
白平衡
手动白平衡/一次白平衡/区域白平衡
可编程控制
图像尺寸、图像拍照、曝光时间、增益、GAMMA、锐度、软件降噪、对比度、亮度、RGB增益、饱和度
支持系统
Windows XP(32位); Win7(32/64位);win 8(32)
支持接口
TWAIN,DirectShow,WDM
数据接口
USB3.0  5Gbps(640M/S)
产品指示
LED上电和待机常亮、工作闪烁
功耗
工作小于2.5W
工作温度
0~50℃
工作湿度
10%-90%(无凝结)
镜头接口
C接口
关于USB 3.0
USB 3.0是最新的USB规范,该规范由英特尔等大公司发起。USB 2.0已经得到了PC厂商普遍认可,接口更成为了硬件厂商接口必备,看看家里常用的主板就清楚了。 USB2.0的最高传输速率为480Mbps,即60MB/s。不过,大家要注意这是理论传输值,如果几台设备共用一个USB通道,主控制芯片会对每台设备可支配的带宽进行分配、控制。如在USB1.1中,所有设备只能共享1.5MB/s的带宽。如果单一的设备占用USB接口所有带宽的话,就会给其他设备的使用带来困难。(by 百度百科)

明美光电年终之旅:从化碧水湾温泉


2013年1月26-27号,我司组织了公司全体员工展开了2天的年终旅游——从化碧水湾泡温泉!除了泡温泉之外,当然还有丰厚的年终大奖抽奖仪式,公司为大家准备了一等奖iPhone 5,二等奖三星平板电脑等丰厚奖品!现在从下面的图片来回顾下我们公司的这次愉快旅行!!!

明美光电员工集体照
明美光电员工集体照
几大美女们
前进途中
游船
张总,曾经理晚宴敬酒
大家吃得非常开心
市场部萍姐和技术部琨哥为大家表演舞蹈
张总正在为大家揭开一等奖iPhone5 得主
这就是一等奖iPhone 5得主,销售部的旺仔
销售部的李经理和刚哥(刚哥是二等奖得主 三星平板一台)
KTV中的美女聊天
大合唱

2013年1月27日星期日

显微镜下的食品病毒


进入21世纪,随着物质产品的不断丰富、生活水平的日益提高,人们对饮食的需求也越来越高,越来越精细。然而,冷冻食品被检出含有致病性金黄色葡萄球菌、奶制品中致癌物黄曲霉毒素超标、糕点菌落超标上千倍、餐饮单位餐具被检出大肠菌群……五花八门、接二连三的食品质量问题时不时给兴头上的人们泼上一盆盆凉水,不仅浇灭了他们对美食的向往,更冷却了他们信任食品质量的热情。金黄色葡萄球菌可引起肺炎、败血症;黄曲霉毒素是一种剧毒物质,对人的肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡……虽不至于谈“食”色变,但已然人心惶惶。--显微镜下的食品病毒

不难看出,目前层出不穷的食品质量问题都涉及到同一种物质,那就是微生物。微生物是地表上数量最多的生物,遍布人类生活的每个角落。据说,它们在距今约30多亿年前就出现了,可以说见证了人类的发展,人类应该对它们相当熟悉。但直到17世纪,荷兰商人列文虎克发明了世界上第一台光学显微镜后,人类才首次看见微生物的模样。由于绝大多数微生物都小得看不见或看不清,所以始终处于被忽视、被遗忘的境地,尤其是普通公众对它们知之甚少。这群生活在微观世界里的生命到底是怎样的生物,又是如何影响我们的日常生活?人类应该和它们分庭抗礼还是和平相处?……《掉在地上的饼干能吃吗——有关微生物的必要常识》(以下简称《饼干》)解答了我们的种种疑问。

微生物和人类朝夕相处,其中的细菌、真菌、病毒可以说是公众最为了解。在《饼干》一书中,你可以看到经常上报纸头条的葡萄球菌、链球菌、幽门螺杆菌等大名鼎鼎的微生物的身影。葡萄球菌属的著名成员金黄色葡萄球菌在1980年曾引发“中毒性休克综合征”的疾病,800多名女性由于使用了被污染的卫生棉条而受到感染,其中有40多名不幸丧生;家喻户晓的儿童电视节目《芝麻街》中木偶的创造者亨森(Jim Henson)就是因为感染上一种会释放毒素且能高速增殖的链球菌导致肺炎而病逝的;而困扰许多患者的胃溃疡、十二指肠溃疡,甚至胃癌的,正是名声大噪的幽门螺杆菌……

看到这里,也许你不禁要问:微生物难道都是和人类过不去的家伙吗?答案当然是否定的。此书不仅列举了“坏微生物”的罪状,还罗列了“好微生物”的功绩。例如,霉菌界的超级巨星——青霉菌,它被发现能提取青霉素,大大增强了人类抵抗细菌性感染的能力,开创了人类使用抗生素治疗疾病的新纪元;大肠杆菌在绝大多数情况下安分守己,还能帮助合成维生素K2;乳酸杆菌为人类的食品工业做出了许多贡献,是一群生活在机体内,有益于宿主健康的微生物,能维护人体健康和调节免疫功能……随着科技日新月异的发展,越来越多的微生物被用来造福人类,如嗜酸微生物可用来保存食品,纳米生物学还会借助一种病毒,警告人体内部出现毒素,为癌症发病预测开创先河……

在公正地评价林林种种的微生物的同时,作者还详细介绍了居家、工作场所、公共场所等各种环境中的微生物世界,病菌的传染途径和方式,以及如何提高自身免疫力,预防感染的秘诀,并提供了诸如“砧板保养小贴士”、“旅行小贴士”等健康提示。对于公众在微生物方面普遍存在的误区,作者也进行了澄清。例如,许多消费者认为用了抗菌肥皂就可以杀菌了,殊不知抗菌成分必须在洗涤表面停留足够的时间后才能起作用,而相当一部分人洗手都草草了事,得到心理安慰的同时却没有享受到抗菌成分的益处。

《饼干》是“让你大吃一惊的科学”书系中的一本,作者是美国知名微生物学家。作为一本介绍微生物的科学读物,它秉承了该书系的特色,通篇没有艰涩的专业术语,内容深入浅出,文字通俗易懂,清晰地勾勒出显微镜下的无声兵团,涉及的微生物知识都和日常生活密切相关,全书最后还对大众最关心的25个问题进行了解答,可以说兼具可读性与实用性。看了这本书,你不仅能了解很多微生物学知识,还能更理性地看待开篇提及的那些食品安全问题,因为人类完全可以通过加强对食品卫生的监管,树立科学的生活观念,养成健康的生活方式与习惯,从而与微生物和平共处。

来源:网络

2013年1月18日星期五

徕卡倒置荧光显微镜操作教程


徕卡倒置荧光显微镜操作教程

一、明场观察
1.  把要观察的载玻片固定在载物台上。
2.  打开显微镜右侧的电源开关,挡光片往下打。
3.  调节聚光镜座至BF位置,荧光转盘调至4位置,物镜棱镜调至BF位置。
4.  先用低倍镜进行观察,然后转至高倍镜。
5.  观察完毕,取下载玻片,把物镜调至空档处,盖好物镜和目镜防尘盖。关上电源,盖上显微镜防尘罩。
6.  做好使用记录。
二、荧光观察
1.  打开荧光观察专用的汞灯光源,预热2~3分钟。
2.  先在普通光下观察,对焦,然后将挡光板往上打,将普通光路挡住,转至汞灯光路上。
3.  将荧光滑片拉出,调节荧光转盘至所需荧光相应位置。(1-紫外激发 340~380nm;2-蓝光激发 450~490nm;3-绿光激发 510~560nm;4-明场)
4.  观察完毕,关闭汞灯光源。(为延长汞灯寿命,开启30分钟后再关闭)
5.  观察完毕,取下载玻片,把物镜调至空档处,盖好物镜和目镜防尘盖。关上电源,盖上显微镜防尘罩。
6.  做好使用记录。

2013年1月17日星期四

奥林巴斯荧光显微镜 Olympus SZX16 操作教程


奥林巴斯 SZX2 系列建立在SZX系列的基础上,承继并超越了SZH系列,在各领域都树立了新的标准。其关键在于应用了多种新的设计:采用卓越的伽利略光学系统的光学设计提供完美的图象效果,并且能够保证与各种图像设备的兼容。

物镜:                     1×
变倍:                     0.7~11.5


荧光滤色块转盘:   UV       蓝
   GFPHQ   绿
                   RFP2     红
                 
SZX16 操作步骤:
   明场观察:
1. 将样品置于载物台上
2. 推入光路选择拉杆,荧光滤块转盘拨到空位
3. 选择合适的光源
冷光源观察
 使用不透明的底板(黑或白),打开环形光电源开关(“︱”为开,“○”为关),调节光强度,找到预观察视野,调节变倍比,观察样品
底光源观察
    使用透明玻璃底板,打开底座电源开关(“︱”为开,“○”为关),将LBD滤片推入光路,调节反光镜方向、对比度和光强度,找到预观察视野,调节变倍比,观察样品
4. 拍照时将光路选择拉杆拉出
荧光观察:
1. 将样品置于载物台上
2. 一般选择黑色不透明底板
3. 打开汞灯电源开关
4. 荧光光路挡板推出
5. 根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
6. 找到预观察视野,调节变倍比
7. 观察样品
8. 拍照时将光路选择拉杆拉出

SZX16 关机:
1. 关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次开启)
2. 将明场光强调到最小,关闭明场电源开关
3. 取出样品,将变倍比调到最小
4. 确认数据已经保存,关闭软件
5. 使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据)
6. 关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况

Olympus SZX16   操作注意事项
1. 工作日使用仪器,开关机器、汞灯由工作人员负责,操作者不得自行开关!
2. 若使用油镜,使用完毕后,镜头的檫拭也由工作人员负责。
中午、晚上及双休日为经过培训后具有完全独立操作资格使用者的使用时间,需本平台特批,课题组长签字同意并担保仪器的使用安全。

奥林巴斯 SZX16 国内代理销售商--明美光电 MSHOT

奥林巴斯荧光显微镜 Olympus IX71 操作教程


奥林巴斯 IX71(配置参数) 倒置显微镜与崭新的UIS2 光学系统相结合,开创了活细胞成像的新世界。

奥林巴斯荧光显微镜 Olympus  IX71 操作教程:

物镜:              物镜倍数     相差环
4 ×0.13     PHL                    
                    10×0.30     PH1                                    
                    20×0.45     PH1                                    
                    40×0.60     PH2                                    
                    60×1.35  oil (无相差)                                      
                                                         

荧光滤色块转盘:    1.  WU      蓝
                    2.  WIB     绿(长通)
3.  WIBA    绿(带通)
4.  WIGA    红
5.  CFP
6.  YFP


Olympus  IX71 操作步骤:
  相差观察:
1. 打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关)
2. 将样品置于载物台上
3. 将光路选择旋钮调至观察位置
4. 从低倍镜开始观察,调节到与镜头相匹配的相差环,荧光滤块转盘拨到 “1”的位置
5. 调节透射光光强,调节焦距,找到预观察视野
6. 依次换到高倍镜,(注意调节相差环)观察样品
7. 拍照时将光路选择旋钮调至相机位置

  荧光观察:
1. 打开明场电源开关
2. 打开汞灯开关
3. 将样品置于载物台上
4. 将荧光光路shutter打开(“○”为开,“●”为关),需保护样品时关闭shutter
5. 将光路选择旋钮调至观察位置
6. 根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
7. 通过两组减光滤片调节激发光强度
8. 从低倍镜开始观察,调焦,找到预观察视野,
9. 依次换到高倍镜头,观察样品
10. 拍照时将光路选择旋钮调至相机位置

普通明场观察:
1. 打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关)
2. 将样品置于载物台上
3. 将光路选择旋钮调至观察位置
4. 从低倍镜开始观察,相差环拨到明场(BF)位置,荧光滤色块转盘拨到“1”的位置
5. 调节透射光光强,调焦,找到预观察视野
6. 依次换到高倍镜,观察样品
7. 拍照时将光路选择旋钮调至相机位置


Olympus  IX71 关机:  
1. 关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次开启)
2. 将透射光强调到最小,透射光选择按钮按出
3. 关闭明场电源开关
4. 将镜头转到低倍镜,取出样品,若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头
5. 确认数据已经保存,关闭软件
6. 使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据)
7. 关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况


Olympus  IX71   操作注意事项
1. 工作日使用仪器,开关机器、汞灯由工作人员负责,操作者不得自行开关!
2. 若使用油镜,使用完毕后,镜头的檫拭也由工作人员负责。
中午、晚上及双休日为经过培训后具有完全独立操作资格使用者的使用时间,需本平台特批,课题组长签字同意并担保仪器的使用安全。


奥林巴斯荧光显微镜 BX51 操作教程



BX51是奥林巴斯荧光显微镜系列中的一款明星产品,国内的高校和研究所使用得最多。奥林巴斯 OLYMPUS BX51荧光显微镜合多种观察方法,从明场到荧光。


BX51 操作步骤:(注意:样品须在低倍镜下放置和取下)

BX51 DIC观察:
1.       打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关)
2.       将样品置于载物台上,用样品夹夹好
3.       将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路,荧光滤块转盘拨到“1”位置,DIC棱镜应与相应的物镜倍数相匹配
4.       先选用低倍物镜(“10×”)
5.       调节透射光的强度,调节焦距,找到视野
6.       换到高倍镜头,观察样品
7.       DIC观察时,光路选择拉杆拉到中间位置,既可观察,也可拍照


BX51 荧光观察:
1.       打开明场电源开关
2.       打开汞灯电源开关
3.       将样品置于载物台上,用样品夹夹好
4.       检偏器、DIC棱镜在光路外
5.       将荧光光路shutter打开(“○”为开,“●”为关),需保护样品时关闭shutter
6.       光路选择拉杆推至最里边
7.       根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
8.       通过两组减光滤片调节激发光强度
9.       从低倍镜开始观察,调焦,找到预观察视野,
10.    依次换到高倍镜头,观察样品
11.    拍照时光路选择拉杆完全拉出

BX51 普通明场观察:
1.       打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关)
2.       将样品置于载物台上,用样品夹夹好
3.       起偏器、检偏器、DIC棱镜在光路外,荧光滤块转盘拨到“1”位置,DIC棱镜拨到明场(BF)位置
4.       先选用低倍物镜(“4×”)
5.       调节透射光的强度,调节焦距,找到视野
6.       依次换到高倍镜头,观察样品
7.       光路选择拉杆拉到中间位置既可观察,也可拍照

BX51 关机:
1.  关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次开启)
2.  将透射光调到最小,关闭明场电源开关
3.  将镜头转到低倍镜,取出样品,若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头
4.  确认数据已经保存,关闭软件
5.  使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据)
6.  关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况


 BX51  操作注意事项
1.              工作日使用仪器,开关机器、汞灯由工作人员负责,操作者不得自行开关!
2.              若使用油镜,使用完毕后,镜头的檫拭也由工作人员负责。
中午、晚上及双休日为经过培训后具有完全独立操作资格使用者的使用时间,需本平台特批,课题组长签字同意并担保仪器的使用安全。

关于荧光显微镜 BX51的纤细参数请移步到 http://www.mshot.com/bx51yingguang.htm

荧光显微镜基本操作教程和注意事项


荧光显微镜基本操作教程和注意事项

此教程适用于国产(例如:mshot的各系列荧光产品)和进口的荧光显微镜(例如:奥林巴斯各系列荧光产品)。同样不同功能的,例如生物荧光显微镜,体视荧光显微镜,数码荧光显微镜等都是使用的。

1. 关闭房间内的电灯,开启荧光显微镜汞灯;
2. 根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片;
3. 放好样品,找到合适的视野;
4. 如需拍照,请确认照相机内已装好彩色
胶卷(最好使用27定胶卷);
5. 开启荧光显微镜自拍装置,选择手动档,通常拍摄
速度在0.5---10秒内;
6. 使用结束,关闭所有电源并做好使用记录。
7. 如需详细说明,请借阅说明书。

注:
A.为延长汞灯的使用寿命,汞灯开启不到15分
钟的请在15分钟后关闭荧光显微镜的汞灯。
B.在荧光状态下观察标本,标本内的荧光染色会较快的衰减,所以要避免长时间的在荧光下观察。

荧光显微镜的功能配置及应用要点


本文是一片来自网络的关于荧光显微镜日常操作文章,作者:崔泽实 郭德伦


在荧光显微镜观测时 , 镜像模糊、荧光暗弱、亮度不均、拍摄记录条件难以控制等是困扰实验者的常见问题。除荧光标本的制备环节外 , 掌握仪器的基本原理 , 合理配置、正确使用、必要的实时调试也是非常重要的 , 本文拟对后者略谈工作体会。 荧光显微镜是利用特定波长的光照射被检物体产生荧光进行镜检的显微光学观测技术 , 已有 100 多年历史。近年来 , 由于免疫荧光在医学研究、诊断领域里的广泛应用 , FISH、绿色荧光蛋白 ( GFP) 技术分别在基因组学、蛋白质组学研究方面的推广 , 显微照相、数字 CCD 成像技术的辅助驱动 , 赋予这一传统技术更新的应用价值和生命力。

1 基本原理
荧光: 是一种非温度辐射冷光 , 据发生性质可分为光化荧光 (由特定光源光谱激发而产生的荧光) 、放射荧光 (放射性物质激发) 、生物荧光 (生物体发出) 、化学荧光 (如磷氧化时) 等。荧光现象: 某物质在受到某种特定波长的高能量光 (短波长) 照射后获取能量 , 几乎即时 (约在 10~15 s 后) 其分子内的电子跃迁到较高能级轨道使分子进入激发态 , 激发态的分子不通过内部转换方式消耗能量回到基态 , 而是释放出相应较低能量的光量子→人眼可见的荧光 (较长波长) 。荧光现象有两种:一次荧光现象 , 又称"固有荧光"或"自发荧光", 是指经照射后 , 就能发出荧光的物质 , 此类物质的化学特征是发光分子具有共轭双键 , π电子活动性大。

二次荧光现象 , 又称"继发荧光", 物质经照射后不能或只能部分发生微弱的荧光 , 这样就需先用荧光色素 (或称荧光染料、荧光探针) 标记处理 , 将荧光色素标记结合插入到不发光的活性分子中去 , 再经照射才能发生荧光。荧光色素应具备的基本条件是能与不发光分子的某个区域有特异性的牢固结合 , 同时不会影响被结合分子的结构和特性 , 光量子效率应≥013。

荧光 的 产 生 包 含 了 激 发 ( Excitation) 和 发 射(Emission)两个过程 , 激发光谱短于发射光谱 , 故光色不同。而不同的荧光物质或荧光色素有其最敏感而有效的激发波长 , 因此选择合适的激发/ 发射光谱以获得最佳的荧光镜像质量是实验中要首先考虑的。荧光显微镜是利用"光化荧光"成像 , 如果所选激发波长在肉眼所看不见的近紫外光区 ( 320~400 nm) , 荧光的发射光谱也较普通光镜光源的平均波长短 , 光学分辨率提高。

2 荧光显微镜装置

近代荧光显微镜多是在复式显微镜的架构上安装荧光装置集合而成 , 荧光装置包括荧光光源、激发光光路、激发/ 发射滤光片组件等器件。荧光光源: 提供特定激发光波长范围及其光效能量的光源 , 以保证检测样品得到足够的激发而发出强的荧光。一般荧光显微镜多采用汞灯做光源 , 能够在常用激发光波长范围内提供不连续的光谱 , 在几处常用的光谱线 (365、405、449、550、600 nm) 表现有较强的光效能;如果荧光仅限于可见光范围内激发(如免疫荧光常用的 FITC ,436~490nm) ,也可考虑采用卤素灯光源;如追求紫外光激发效能的连续稳定性也可采取带状光谱特征的氙灯光源(细胞内 Ca+ +测定) 。在光源灯箱外侧装有 2~3 个灯丝对中心调整镙杆。荧光共焦显微镜则是用激光器经光纤导光做光源。荧光光光路: 或称荧光照明器 , 主要部件是一组聚光透镜 , 装有光路对焦调节; 在光路中还设有孔径光阑和视场光阑调节器件、ND 滤光片插槽 (板) 、激发光分光或处理镜件等。

激发/ 发射滤光片组件: 是一组具有一定通带宽度、带通 , 把激发/ 发射光谱选择性地限定在某一特定波宽内或带通的光学滤镜器件。目前多数厂家是把激发和发射光滤光片组合在一个立方体状结构里 , 安装在多位盘状转换器上调置于激发/ 发射光路中 (物镜与目镜间的镜筒) , 在两光路的垂直位成 45°角置一片称之为双色分光镜 (Dichroic Beamsplitter) 的滤光片选择性的透过或截止激发光和发射光。依据荧光样品的激发和发射光谱不同生产有不同宽窄带宽、长短带通组合的激发/ 发射滤光片组件 , 例如 EX470/ 40 或EX480/ 20 , 则 表 示 激 发 光 谱 是 在 中 心 波 长470 nm ±20 nm之间或 480 nm ±10 nm 之间 , EM522/ 40或 EM500 , 表示发射光谱在 522 nm ±20 nm 之间或≥500 nm (长发射通带) 。

荧光显微镜装置有透射式和落射式两种类型。近代荧光显微镜多采用落射式 , 即激发光是从物镜照射到样品 , 样品受激发后发出的发射光再经物镜聚光投射到观测光路 , 操作简单、视场均匀、高倍明亮、低倍暗。落射式荧光装置光路 , 见图 1。激发光从进入经物镜照射到标本上产生的荧光再反射给物镜观察 , 适于透明及非透明标本。

3 功能配置
要根据对显微荧光观测技术的实际需求 , 考虑以下因素 , 配置相应的功能附件。
1) 荧光照明器
个别厂家的荧光光源收光镜在质量上有消色差和复消色差两种 , 前者可满足常规工作 , 特殊研究可选后者。如果观测样品荧光亮度强 , 可选配适当透过率的 ND 滤光片。

2) 激发/ 发射滤光片组件
理论上应当针对拟使用的荧光色素或样品的荧光特性选择对应波谱的激发/ 发射荧光组件 , 做到合理搭配 , 但由于组件的种类繁多且价格较贵 , 一般常配宽带/ 长通滤光片组件。如果实验条件明确 , 则可以选择窄带/ 短通组件 , 如 GFP、FISH 观察。当然还有多波长组合 , 同时观测多个荧光光谱。除荧光显微镜生产厂家外 , 还可以向专门生产激发/ 发射滤光片的厂家 (如 , Chroma , Omega 等) 订购。常用荧光激发/ 发射组件及其适用的荧光色素见表 1。

3) 物镜
临床检验中有使用平场消色差物镜的情形 , 但若经常做 UV 激发会造成镜头老化 , 且会产生自发荧光。为达到较好的荧光观察效果 , 应考虑配置:
(1) 用无荧光氟石或萤石玻璃制成不会受激发产生自发荧光的落射荧光专用物镜。
(2) 如果用一个物镜兼顾荧光与透射相差成像 ,物镜级别一定要高 , 但因此种物镜的后焦面装有相位板会影响荧光成像效果 , 观测荧光较弱的样品最好要另配常用倍率的荧光专用物镜。
(3) 数值孔径尽量大 , 以获得较好的镜像亮度(亮度 = NA 物镜/ 放大倍率) 和分辨率。
(4) 要充分考虑待测样品的工作距离 , 对 40 ×以上物镜 , 如果载片较厚或是用倒置荧光观察培养器皿 , 应选择长工作距离的物镜且最好装有覆盖差校正环。

(5) 带数值孔径调节环的 100 ×油浸物镜。
(6) 用 FURA2 标记做细胞内 Ca+ + 测定或其他UV 激发 , 最好选用 UV 专用物镜。
4) 显微镜如用落射荧光仅是做常规荧光镜检 , 对显微镜就不一定追求高功率的透射光光源 , 6 V 30 W 卤素灯也可。但如果经常需要配合透射光观察 (如相差、DIC
等) 和兼做明场显微照相的情况下 , 则最好选择12V100W卤素灯光源机型; 相应周到考虑聚光镜的配置(如相差聚光镜) , 有条件最好选择兼顾明场、暗场、相差、DIC等功能的通用聚光镜。还要充分照应到荧光照相、数字 CCD 相机的接口适配能力。

5) 显微照相装置
要求应当是自动机型但有手动控制功能 , 另需具备 011 %或 1 %点测光和设有专用于荧光照相的拍摄模式 , 因荧光镜像的背景或物像较暗 , 最好配置有照明调焦调焦标线的取景放大镜 , 以利于调焦。

6) 数字 CCD 相机
数字 CCD 成像技术发展甚快 , 与显微镜配套使用的数字 CCD 相机种类较多。追求分辨率固然重要 ,但若获取好的显微荧光成像质量 , 还要考虑 CCD 的成像方式、灵敏度、成像速度、芯片对所用荧光素发射波长的量子利用效率等技术参数。满足一般荧光成像应采用科学级芯片 , 最好是冷 CCD , 以消除荧光成像遇到的暗流 (Dark Current) 干扰。

4 应用要点
1) 预检查和调节
(1) 在每次进行荧光观测前 , 必须例行检查荧光装置的灯丝对中、光路对焦、孔径光阑、视场光阑设置等状况。
(2) 所需要的荧光激发/ 发射滤光片组件是否已装在转换器中 , 物镜配置是否得当 , 除去物镜前透镜的油渍和灰尘。
(3) 如同时进行透射光相差观察 , 要检查聚光镜对中心及相差环与物镜相反的共轭情况。
(4) 检查样品载体 (载玻片、盖玻片和其他器皿) 有否挂有液体、灰尘 , 厚度是否在物镜标定的工作距离范围内。切片样品不能太厚 , 约 ≤10μm为宜。
(5) 因照明光源含有紫外线 , 在载物台前上方放一块棕色遮光板 , 以防紫外线损伤视网膜。
(6) 电压不稳会降低高压汞灯的使用寿命 , 光源电源最好加配稳压器。

(7) 为延长汞灯寿命 , 在开启后 15 min 方可关闭; 汞灯荧光电源一旦关闭 , 再次启动至少需等待10min , 以使水银蒸汽冷却复至原态 , 否则会影响灯的寿命。

2) 荧光镜像观察
(1) 在开启荧光灯源后约 5~10 min 激发光强度趋于稳定 , 装载样品进行观察; 为防止在调焦和寻找物像过程中过度激发光照会造成样品荧光淬灭 , 最好先通过缩小荧光照明器的孔径光阑或加 ND 滤光片将激发光调节到适度强度 , 有规律地移动样品台 , 待确定镜像后 , 在调节到最佳荧光状态用于拍摄记录。

(2) 镜像质量不佳的调整。排除样品制备因素外 , 可进行的必要调节措施是: ①排除成像光路中的遮光或限光器件 , 如 DIC 附件、ND 滤光片等。②重新调节荧光照明器的收光器对焦和孔径光阑大小。③细心调节物镜覆盖差校正环。④复查荧光激发/ 发射组件是否与所标记的荧光色素对应。

(3) 在不影响分辨率的前提下 , 于照相取景框和CCD 靶面范围之外 , 可尽量回缩荧光光路视场光阑和物镜 (100X 物镜) 的数值孔径光阑调节环 , 以避免杂散光的影响、提高景深 , 并可减小激发面积防止附加样品淬灭。
(4) 暂时不观察时 , 应阻断激发光路。
(5) 油镜观察时 , 须用"无荧光油", 尤其是在U、V 激发时 , 因常规镜检用的香柏油带有青色荧光。

3) 荧光照相和数字 CCD 相机图像采集
(1) 荧光照相

①尽管肉眼观察荧光镜像亮度与普通明场相差无几 , 而实际上曝光时间要增加数倍甚至几十倍 , 应使用 快 速 感 光 胶 片 , 如 ISO200 ( 24DIN ) 、ISO400(27DIN) 。②根据荧光物像在测光区的分布比例和镜像的明暗程度设置曝光补偿调节 , 原则上适当增大补偿 , 以获得背景黑暗荧光图像明亮、鲜艳的照片效果。③如果没有照明标线取景器 , 可先选择较明亮的荧光区域进行对焦调整。④对点状荧光物像或扑捉某点为主的拍摄 , 可选择适当的点测光模式。⑤对在同一幅需要同样条件拍摄的分散点状荧光物像 , 可试用点测光配合自动锁定方式拍摄。⑥曝光过程应避免任何振动 , 有条件可配置防震台。

(2) 数字 CCD 相机图像采集
①光学接口的中间倍率要与 CCD 的芯片尺寸合理匹配。②采用合适的荧光拍摄模式 , 摸索减背景(Background Subtraction) 处理条件 , 根据镜像情况设置 Binning、Gain、Gamma 等参数。 ③因 CCD 芯片灵敏度较高 , 如果荧光镜像过于明亮 , 为获取对比度较好的采集图像 , 可适当缩小荧光照明器孔径光阑或加ND 滤光片 , 特别是在荧光辉光较强影响拍摄样品细节的情况时。实际工作中 ,为获得较好的荧光图像拍摄质量需要对上述调节机制的综合运用 ,反复摸索、优化条件。